高效液相色谱法对山药中尿囊素的含量测定

山药原产于山西平遥、介休。现主产于河南新乡地区的温县、孟县、沁县、博爱、武陟等县，习称＂怀山药＂为道地药材。是全国驰名的四大怀药之一。河北、陕西、江西、广东等地亦产。 ［采收加工］冬季茎叶枯萎后采挖，切去根头，洗净，除去外皮及须根，用硫磺熏后，干燥；也有选择肥大顺直的干燥山药，置清水中，浸至无干心，闷透，用硫磺熏后，切齐两端，用木板搓成圆柱状，晒干，打光，习称＂光山药＂。在加工是切下断头长寸许的则称为＂段山＂或＂寸山＂，碎断次货称＂料山＂。 ［化学成分］块茎含皂苷、粘液质、胆碱、淀粉（１６％）、糖蛋白和自由氨基酸，还含枝杈素（d-abscisinⅡ）、多酚氧化霉、维生素Ｃ（5mg％）、３，４，－二羟基苯乙胺，粘液中含甘露聚糖（mannan）与植酸（phytic acid）。日本薯蓣含薯蓣皂苷（dioscin），其苷元为薯蓣皂苷元，也是薯蓣属植物块茎常有的成分［１］。 还含胆碱（choline）、脱落素（abscisin）、尿囊素（allantoin）多巴胺、（dopamine）、山药碱（batatasine）［２］。 [主要成分理化性质和药理作用]尿囊素：分子式C4H6N4O3，分子量158.12，单斜片状结晶或棱柱结晶（水），熔点238℃。Lg溶于190ml水，500ml乙醇，在热水和热乙醇中溶解度更大。几乎不溶于乙醚[3]。 尿囊素具有镇静作用，其里铝盐有除臭及收敛作用。 [含量测定]山药中尿囊素的含量测定[4][色谱条件]色谱柱：Zorbax ODS C18（250mm×4.6mm），保护柱：Zorbax ODS （20mm×2.0mm）；流动相：甲醇-氯仿-水（0.5∶0.012∶100）；流速：0.5ml/min；检测波长：224nm；柱温：35℃。 [供试品的制备]取本品粉末约0.5g，精密称定，加水1ml润湿，加甲醇7ml，超声20min定容，振荡，于4℃静置，沉淀糖类、淀粉、蛋白质等醇不溶物，吸取上清液0.5ml，挥去甲醇，用纯水0.5ml与40℃超声或振荡溶解尿囊素，高速离心10min，吸取0.2ml用甲醇再生，并以纯水平衡的Sep pak C18小柱，用纯水3ml 洗涤，滤过，滤液定容至5ml，取部分溶液与4000转/min。按本法色谱条件进行测定，结果见下图[讨论]根据尿囊素溶于热水和甲醇的性质，本法设计了用水溶解后加甲醇提取尿囊素和蛋白质、淀粉、糖，同时样品制备的方法。继而以水取代提取液中甲醇，除去水不溶物，再将样品的水溶液通过C18小柱净化，尿囊素获较好的回收，而流动相较难洗提的中草药中的成分则留于C18小柱上端，避免了对尿囊素测定的干扰，简化了样品前处理步骤以获得准确可靠的结果。本文标签：